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La diagnostica vegetale applicata al rilevamento
 e al controllo di virus e fitoplasmi


CORSO TEORICO - DIMOSTRATIVO

10-11-12 aprile 2006

Il corso, rivolto a tecnici operanti nel settore, parte dagli aspetti legislativi di certificazione e di quarantena del materiale vegetale, orticolo e frutticolo e prende in rassegna le principali tecniche di rilevamento di virus e fitoplasmi, con particolare riferimento a due specie di elevata importanza per l'Italia: vite e pomodoro. Per la vite, si esamineranno le principali virosi (degenerazione infettiva, accartocciamento, legno riccio, maculatura infettiva) e fitoplasmosi (flavescenza dorata e legno nero). Nel caso delle virosi del pomodoro ci si riferirà invece a: CMV, TSWV, TYLCV e TYLCSV.
Il corso permetterà di conoscere, in teoria e in pratica, le più avanzate metodologie diagnostiche applicabili in questo settore. 
Specificatamente, per la parte di diagnostica verranno prese in esame le seguenti tecniche:

  • PCR
    diagnosi di  giallumi della vite (Flavescenza dorata). Verranno illustrate in dettaglio le fasi di preparazione del campione da analizzare, di allestimento della reazione polimerasica a catena (PCR), dell'analisi dei prodotti mediante elettroforesi e della loro visualizzazione. Sarà affrontato il problema della necessità di ricorrere alla nested PCR per la diagnosi di fitoplasmi presenti in bassa concentrazione. Si procederà inoltre a un'analisi del polimorfismo dei frammenti di restrizione per ottenere l'attribuzione dei fitoplasmi diagnosticati ai diversi sottogruppi tassonomici.
  • Sierologia
    tecnica ELISA per la diagnosi dei virus, in particolare di tospovirus quali tomato spotted wilt e impatiens necrotic spot. Verrà confrontato l'utilizzo della tecnica DAS ELISA, con soli anticorpi policlonali, e della tecnica TAS ELISA che prevede l'uso di anticorpi policlonali e monoclonali.
    Uso di metodi immunocromatografici tipo "lateral flow" di semplice utilizzo, in grado di rilevare i virus in tempi brevissimi, e loro confronto con la tecnica ELISA
  • Sonde molecolari

diagnosi di virus a RNA e a DNA di rilevante importanza economica. Verranno illustrate le diverse fasi della procedura. Saranno considerate le possibilità di preparazione del campione adatte alle varie esigenze: estrazione dell' RNA o DNA totale, estrazione veloce di succo, impronta tissutale su membrana. Saranno utilizzate sonde molecolari non-radioattive, si valuteranno le condizioni di ibridazione più adatte e si illustrerà il rilevamento del segnale attraverso una reazione di chemiluminescenza.

10 aprile 2006

10.00-10.15
Introduzione al corso
G.P. Accotto, IVV, CNR, Torino

10.15 -11.15
Gli aspetti di certificazione e di quarantena del materiale vegetale
I. Scapin, Servizio Fitosanitario Regione Piemonte

11.30-12.30
Tassonomia di virus e fitoplasmi
M. Turina e C. Marzachì, IVV, CNR, Torino

12.30 - 13.00
Tipi di trasmissione in relazione alla diagnosi
M. Conti, IVV, CNR, Torino

13.00 – 14.30 Pranzo

Sessione teorica-dimostrativa

14.30 – 18.00
Diagnosi e rilevamento delle fitoplasmosi della vite
C. Marzachì, IVV, CNR, Torino


11 aprile 2006

Sessione teorica –dimostrativa
Diagnosi e rilevamento delle principali virosi del pomodoro

9.30 -13.00
Diagnosi e rilevamento dei virus dell'accartocciamento fogliare giallo del pomodoro (TYLCV e TYLCSV)
G.P. Accotto, IVV, CNR, Torino

13.00 -14.30 Pranzo

14.30 -17.30
Diagnosi e rilevamento del virus del mosaico del cetriolo (CMV) e del virus dell'avvizzimento maculato del pomodoro (TSWV)
M. Turina, IVV, CNR, Torino;
D. Gallitelli, IVV, CNR, Bari

12 aprile 2006

9.30-10.30
Diagnosi delle virosi della vite
D. Boscia, IVV, CNR, Bari

10.30-12.00
Problematiche legate al risanamento della vite
I. Gribaudo, IVV, CNR, Grugliasco

12.00-13.00
Discussione finale




Responsabile scientifico

Dr. Gian Paolo Accotto, IVV, CNR, Torino

Segreteria  organizzativa
Dr.ssa Alessandra Conti
Fondazione per le Biotecnologie
Viale Settimio Severo 63 - 10133 Torino
Tel 0116600187 – Fax 011/6600708
alessandra.conti@fobiotech.org

Sede del corso
Istituto di Virologia Vegetale del Consiglio Nazionale delle Ricerche
Strada delle Cacce, 73, Torino

Quota di partecipazione
Il costo del corso è di € 250,00 più IVA.
La quota d'iscrizione, a fronte della quale verrà emessa regolare fattura, include: 3 colazioni di lavoro, coffee break, materiale didattico, attestato di partecipazione. L'organizzazione non fornisce il camice da laboratorio.
Numero minimo di partecipanti : 10
Numero massimo partecipanti: 20

 



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updated 24.03.2006

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